La hepatitis C es una infección del hígado causada por el virus Flaviviridae HCV, que consta de una o más moléculas de ARN. Como regla general, se toman una serie de medidas de diagnóstico para establecer en un paciente la hepatitis C. La PCR es un análisis que confirma con precisión el diagnóstico. A menudo, la conclusión la dan los médicos cuando el paciente ya tiene los primeros signos de la enfermedad.
¿Qué es la hepatitis C
El daño hepático por una infección viral transmitida a través de la sangre o el contacto sexual se denomina en medicina hepatitis C. El agente causal es un virus que contiene ARN de agentes infecciosos no celulares de la familia Flaviviridae. La infección puede permanecer en el cuerpo durante mucho tiempo sin manifestarse. Por lo tanto, solo cuando se detecta un microorganismo mediante un análisis de sangre mediante PCR ARN ARN, la hepatitis C (como diagnóstico) se considera justificada.
Flavivirus no se produce en células aisladas cultivadas artificialmente. En el proceso de reproducción, el agente infeccioso crea modificaciones inmunológicamente distintas. Estos factores evitan que el cuerpo dérespuesta protectora adecuada, y los expertos tienen dificultades para desarrollar una vacuna eficaz.
El virus se transmite por vía parenteral. Para la infección, debe entrar en cantidades suficientes directamente al torrente sanguíneo.
Qué pruebas se realizan para la hepatitis C
Las patologías virales del hígado se diagnostican mediante pruebas de laboratorio. Los estudios clínicos de la hepatitis C se llevan a cabo estudiando antígenos extraños y peligrosos o compuestos proteicos (anticuerpos) en el biomaterial del paciente, principalmente en la sangre.
- Inmunoensayo enzimático (ELISA). El método se basa en la detección de anticuerpos IgM en la sangre. La inmunoglobulina se considera la más grande y es un pentámero. Se manifiesta en la respuesta protectora primaria de los linfocitos a una sustancia extraña desconocida.
- Radioinmunoensayo (RIA): determinación cuantitativa de inmunoglobulina IgM utilizando un isótopo radioactivo marcado de yodo.
- PCR de hepatitis C - determinación de ARN viral en el biomaterial (sangre). Este análisis confirma de forma fiable el diagnóstico.
La prueba de IgG no es confiable. Su presencia en el suero sanguíneo puede indicar no solo la presencia de un flavivirus, sino también otra infección pasada que tenga el mismo patógeno.
Qué determina el análisis PCR
La reacción en cadena de la polimerasa (PCR) se basa en la identificación de regiones de ADN específicas para determinados patógenos en muestras de material para investigación (epitelio, sangre). El análisis permite identificar los organismos patógenos más pequeños (virus) mediante la detección de su ARN o ADN en material biológico.
El procedimiento de laboratorio para la detección de anticuerpos Hepatitis C PCR se realiza en 3 etapas:
- Seleccionar. El biomaterial estudiado se purifica de impurezas y se obtiene ADN en la fase móvil de la columna cromatográfica.
- Amplificación. El análisis se lleva a cabo en el termociclador del dispositivo. Calienta y enfría las probetas con cierta ciclicidad. Para un estudio, se realizan hasta 35 ciclos. El resultado es un número suficiente de fragmentos de ADN para detectar, identificar y evaluar el patógeno.
- Electroforesis. Los fragmentos resultantes se colocan en un gel con diferente saturación de agarosa y se realiza electroforesis. El electroferograma resultante se analiza en una computadora.
No solo se utiliza el estudio de PCR estándar, sino también el análisis de PCR en tiempo real. Este es un diagnóstico en tiempo real. El método permite el análisis cualitativo y cuantitativo, lo que permite identificar la formación y la dinámica de la enfermedad, así como prescribir una terapia destinada a eliminar la causa del origen de la patología. La PCR en tiempo real también se utiliza para determinar un cultivo puro de agentes infecciosos (genotipificación).
¿Cómo se hace la prueba de reacción en cadena de la polimerasa?
Para el diagnóstico se puede utilizar cualquier fluido biológico humano. El biomaterial para las pruebas de hepatitis C suele ser sangre.
El muestreo para diagnóstico se lleva a cabo en el procedimientooficina. Para extraer sangre, use tubos de ensayo desechables con una sustancia que inhiba la coagulación de la sangre. Las actividades enfocadas a prevenir la propagación de agentes infecciosos ayudan a evitar la entrada de otra cepa de microorganismos del exterior.
La sangre para PCR de hepatitis C se toma por la mañana con el estómago vacío. La muestra se envía inmediatamente al laboratorio. Se permite almacenar el biomaterial a una temperatura de +4 a +8 grados centígrados. Los contenedores están etiquetados y provistos de instrucciones. Los resultados de las pruebas están disponibles dentro de las 48 horas, a veces antes.
Tipos de PCR
El rango de aplicación de la reacción en cadena de la polimerasa es bastante amplio. Los infectólogos determinan mediante PCR la hepatitis B, enfermedades transmitidas por insectos chupadores de sangre, SIDA, tuberculosis. En oncología, con este método, las células tumorales se detectan en una etapa temprana.
Hay unos catorce tipos de análisis. El uso de uno u otro tipo depende del alcance y resultados finales de los análisis. Algunos tipos de PCR son indispensables cuando se necesita el resultado en 20 minutos.
Para diagnosticar la hepatitis C, se utilizan 3 tipos de reacción en cadena de la polimerasa:
- La evaluación cualitativa puede ser positiva, lo que indica la presencia de una infección en el cuerpo, o negativa, lo que indica la ausencia de un flavivirus.
- PCR en tiempo real (análisis cuantitativo): determina el ARN cuantitativo del patógeno en UI/ml.
- La genotipificación es un análisis que revela el tipo (genotipo) del virus.
Para identificar y determinar con precisión la enfermedad, seguido delos tres tipos de estudios se utilizan para prescribir una terapia óptima.
Análisis cualitativo de la reacción en cadena de la polimerasa
Un análisis es obligatorio para todas las personas que tienen un ELISA que ha detectado anticuerpos contra el VHC. La PCR cualitativa para la hepatitis C es la prueba de susceptibilidad estándar. El método está dirigido únicamente a la detección, no se realiza el conteo ni el aislamiento de otras sustancias.
Para detectar anticuerpos, se utilizan sistemas de prueba especiales con un umbral de sensibilidad de al menos 50 UI/ml. Si se detectan anticuerpos, se prescriben otras pruebas aclaratorias. Si el resultado es negativo, no se realizarán más pruebas.
En algunos casos, un resultado falso negativo puede deberse a personal de laboratorio incompetente o reactivos de mala calidad. Por seguridad, es mejor retomar el análisis en otro lugar.
PCR cuantitativa
El método se utiliza para estudiar directamente la cantidad de flavivirus en un ciclo de reacción. Para una medición precisa, se utilizan fragmentos de ADN utilizados para la hibridación o cebadores marcados con fluorescencia. Existe una opción de detección económica utilizando el colorante SYBL Green. El tinte se encaja en un pequeño surco en el ADN y se vuelve azul cuando se irradia con un láser.
La concentración la determina el aparato-amplificador en equivalente digital. Los valores pueden variar ligeramente entre laboratorios y, por lo tanto, deben compararse con los valores de referencia.
PCR cuantitativala hepatitis C ayuda a elegir la dosis óptima de medicamentos y determinar la duración de la terapia. La frecuencia del estudio depende de la etapa de la enfermedad, el tipo de genotipo y el curso de tratamiento prescrito.
Determinación del genotipo
El virus de la hepatitis C tiene una composición genética variable. Numerosas modificaciones hacen que sea imposible crear una vacuna y también complican la terapia. Se han identificado y registrado un total de 11 genotipos y 100 subtipos. En los países de la antigua URSS, en personas infectadas con hepatitis C, la PCR detecta principalmente los genotipos 1b y 3.
En presencia de cualquiera de los genotipos, la cirrosis o el cáncer de hígado pueden retozar. Por eso es tan importante detectar el virus a tiempo.
Para algunos pacientes, ciertos medicamentos diseñados para combatir el VHC son tóxicos. La genotipificación le permite determinar el tipo de proteína y prescribir un fármaco eficaz.
En los resultados de las pruebas de tipificación hay un número con una letra latina minúscula que indica el genotipo del virus. Si se detecta el VHC pero no se tipifica, significa que la persona tiene un genotipo que no es típico de una determinada zona geográfica.
Resultados del análisis
El médico se ocupa de descifrar los resultados. Solo los datos de varios estudios (junto con la anamnesis y el examen) pueden dar una imagen real general del historial médico.
- En una persona sana, una prueba de reacción cualitativa en el biomaterial no detecta nada. Si se indica el valor "detectado", se confirma la infección y el pacientenecesita más diagnóstico seguido de tratamiento.
- La determinación del número de agentes infecciosos permite evaluar la carga viral en el organismo. Normalmente, la PCR cuantitativa de la hepatitis C no detecta el patógeno. Un indicador de hasta 810^5 se considera una carga baja y, con la terapia adecuada, garantiza un resultado favorable. Los valores más altos requieren un examen en profundidad y la determinación de una terapia a largo plazo, cuyo resultado positivo nadie puede garantizar.
- Los resultados positivos del genotipado indican qué genotipo se reconoce. Un resultado negativo indica la ausencia de un flavivirus o la presencia de un genotipo que no es típico de esta región.
Qué indica una prueba PCR positiva
Cualquier enfermedad grave requiere un diagnóstico integral. Una PCR de hepatitis C positiva confirma el diagnóstico, pero las predicciones solo se pueden hacer después de estudios instrumentales y de laboratorio adicionales.
La detección de un virus no da una imagen completa de la patología. Es necesario identificar su tipo y naturaleza, para determinar cómo afecta al hígado y otros órganos. La detección temprana del VHC a menudo tiene un resultado terapéutico favorable.
PCR negativa con ELISA positivo
Al observar los síntomas característicos del daño hepático, existe una alta probabilidad de que la infección ya haya ingresado al organismo. Por lo tanto, debe comunicarse con un hepatólogo o un especialista en enfermedades infecciosas. Durante las entrevistas, el especialista recogerá una anamnesis y prescribirá la exploración necesaria.
Siel resultado de los estudios de PCR de hepatitis C es negativo, y el inmunoensayo enzimático es positivo, esto indica la presencia de anticuerpos contra el flavivirus en la sangre. Esto generalmente sucede cuando la infección ingresa al cuerpo en una pequeña cantidad, por lo que el sistema inmunitario la enfrenta por sí solo. Pero esas personas todavía se consideran infectadas y deben ser examinadas cada 6 meses. Si, con los resultados de tales pruebas, a una persona se le niega un examen médico gratuito, es mejor hacerse una PCR por una tarifa para mantener la salud, y si los resultados son positivos, contactar a un especialista para su diagnóstico y tratamiento.
Ventajas y desventajas del método
A la hora de establecer el diagnóstico de hepatitis C, la PCR tiene varias ventajas:
- Detección temprana de patógenos.
- Definición precisa del virus.
- Eficiencia del diagnóstico.
- Porcentaje de error mínimo.
- Alta sensibilidad.
Desventajas del método:
- Alto costo de análisis. La prueba requiere equipo costoso, reactivos y personal médico altamente calificado. Todo junto suma una cantidad considerable.
- Requisitos estrictos para el transporte de biomaterial.
Tratamiento de la inflamación del hígado
El análisis PCR para el virus de la hepatitis C se considera fundamental para el diagnóstico, pero no definitivo. Para que la terapia sea eficaz, se requieren una serie de estudios instrumentales y de laboratorio adicionales. Después de pasar todomedidas diagnósticas el médico prescribe tratamiento:
- Se prescribe la dieta 5.
- El alcohol está completamente excluido.
- Recepción conjunta de Interferón y Ribavirina durante 25 días.
- Cursos de hepaprotectores "Essentiale", "Karsil", "Phosphogliv".
- En casos especiales, se utiliza la plasmaféresis discreta.
Los medicamentos prescritos por un hepatólogo se usan regularmente, sin cambiar la dosis. La duración de la toma de medicamentos la determina el médico después de pasar las pruebas de control. Después de completar el curso de la terapia, debe visitar al médico cada seis meses.
PCR-diagnóstico permite identificar el agente causante de la hepatitis C en una etapa temprana. Esto contribuye a la eficacia de la terapia y la prevención de la transición de la enfermedad a formas tan peligrosas como la cirrosis y el carcinoma hepatocelular.
